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紫外可見分光光度計是實驗室中十分常見的儀器之一，本文就紫外可見分光光度計在檢定中常見的幾個問題進行解析, 例如：在實驗中誤差的來源進行分析與誤差的解決方法，還有儀器出現(xiàn)相關(guān)問題（如：吸收池的使用方法，儀器的預(yù)熱等） 的解決方法，波長準確度的檢驗和矯正.

引言

紫外分光光度計，是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜來研宄物質(zhì)的 結(jié)構(gòu)、成分和物質(zhì)間相互作用的有效手段。此光度計可以在 紫外可見光區(qū)任意選擇不同波長的光。通過每種物質(zhì)*的、 固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上某些特征波長處的 吸光度高低判別或測定該物質(zhì)的含量。而在日常生活和生產(chǎn) 過程中，難免會出現(xiàn)些問題，接下來就常見的一些問題進行 探討。

1.紫外可見分光光度計檢定常見問題的探討

雜散光問題:雜散光的存在使紫外可見光純度會降 低，從而使檢測的誤差增大。雜散光使紫外分光光度計的準 確性己經(jīng)不正確。雜散光的產(chǎn)生與整臺儀器有著密不可分的 關(guān)系，可能由于光敏部位的密封不嚴，光學(xué)元件的錯位、損 壞、不潔凈、老化有關(guān)。

解決雜散光的對策：由于該光度計計的光敏元件是十分 靈敏，要想保持元件的溫度正常則必須進行必要的散熱， 然而通過散熱，空氣中的灰塵會從散熱孔中吸入從而在光敏 元件上進行附著，灰塵的附著會使雜散光超差。解決這些灰 塵，使用酒精擦拭可以解決，使用吹風機進行吹干防止酒 精的殘留。由于反光鏡的制作具有特殊性，軟膜鍍于表面， 所以只能采用火棉膠進行除塵，這樣才能保持鍍于表面的 軟膜不被破壞。另一個容易引起雜散光超差的原因是紫外可 見光光度計元件的位移。一是由于準直鏡導(dǎo)致，修復(fù)此故障 需要進行調(diào)節(jié)準直鏡的螺母，調(diào)節(jié)到誤差消除，直到達到 檢定要求。二是由于聚焦失常，由于聚光鏡和光源燈錯位， 使光斑中出現(xiàn)雜色或者光暈在光斑中出現(xiàn)。這時需要調(diào)整焦 距與光源的位置直至出現(xiàn)一半光斑，純凈且均勻，此時說 明調(diào)整完成，固定好光源位置便可

基線平直度的問題：在紫外可見光光度計中基線 平直度作為主要的技術(shù)參數(shù)，十分重要。由于基線平直度、 漂移和噪聲此三者的綜合作用，讓紫外可見分光光度計性 能突出。當基線平直度的超出誤差范圍時，扭曲值和假峰值 便會在光度計圖譜上出現(xiàn)，從而大大降低光度計的準確性。

解決基線平直度的對策：使基線平直度超差的原因可能 是光的散射，光敏元件被污染等等，通過對光學(xué)軟件的雜質(zhì) 進行清理來進行基線平直度的調(diào)修。如果發(fā)現(xiàn)在光源切換時 基線發(fā)生較大跳動時，需要通過光源的檢查與校正來解決此 問題。當儀器使用長時間以后，要及時得到進行保養(yǎng)與維修 來進行基線平直度的消除。同時通過穩(wěn)壓器的安裝來確保電 壓的穩(wěn)定。

2.儀器預(yù)熱問題的討論

關(guān)于儀器的預(yù)熱，一般分光計光度計的說明書上 的要求大約為20分鐘；如果是帶微處理器的分光光度計， 儀器開機后大約有10分鐘的左右時間進行自檢。而就在分 光計的預(yù)熱過程中，會存在這樣那樣的問題，例如：認為儀 器的初始化過程便是加熱過程，開機只預(yù)熱電路系統(tǒng)。

預(yù)熱的目的：通過進行儀器的預(yù)熱，是儀器達到的使用過程，使得數(shù)據(jù)的測量更加穩(wěn)定與準確。通過儀 器的預(yù)熱，會使光路系統(tǒng)處于穩(wěn)定的狀態(tài)，使電子元件（電 容、電阻）的穩(wěn)定。

預(yù)熱的正確方法：1、對于一般的分光光度計，通 電后，調(diào)節(jié)測定選擇靈敏檔及波長值，在光路上放置一個吸 收池，將吸收池中裝上純水，調(diào)“ 0%T”及“ 100%T” 后，將 吸收池的暗箱蓋蓋上，將儀器預(yù)熱大約20分鐘，當儀器所 顯示的讀數(shù)不再變化后便進行測定。2.對于帶有微處理器有 自檢功能的分光光度計，開機儀器進行自檢結(jié)束后，將所需 的波長值在測定窗口上進行設(shè)置，同樣將裝有純水的吸收池 放置與光路上，調(diào)“0000A”后，將儀器進行預(yù)熱，當儀器 所顯示的讀數(shù)不再發(fā)生變化后進行測定。

由于紫外可見分光光度計具有雙光源，為了燈的使用壽 命，開機自檢結(jié)束后關(guān)掉不需要使用的光源。

3.分光光度計檢定中的誤差分析

由于檢測方法的不當引起的誤差：連續(xù)法經(jīng)常使 用于對于波長示值得檢測，此方法是通過對連續(xù)的驅(qū)動波 長的檢測，利用儀器自身的投射比示值的變化來測試。這種 檢測方法會使測得的光譜產(chǎn)生很大的影響（由于光譜曲線的 影響），這種方法終經(jīng)實踐后被否定。根據(jù)JJG178-2007 的規(guī)定，可以使用逐點法。逐點法是可以保證數(shù)據(jù)準確性的 一種方法，該方法可以將儀器的波長大限度的反映出來。 按照該方法規(guī)定的要求進行檢測便可以減少誤差的產(chǎn)生。

由于檢測的環(huán)境的不符合所造成的誤差：當進行 物質(zhì)的檢測時，可能受到檢測的環(huán)境的影響，環(huán)境的不符合 會造成誤差。例如：若未對分光光度計進行處理（即密封處 理），或者儀器的密封性不是很好，會讓強光直接照射光源 系統(tǒng)，從而使雜散光減少，使檢測結(jié)果產(chǎn)生誤差。如果環(huán)境 中含有較多的灰塵，會使灰塵沾染到濾光片，從而產(chǎn)生誤差。

4.波長準確度的檢查與矯正 在平常使用分光光度計時，并不需要進行儀器波長準確 度的檢查。若在平常測定中發(fā)現(xiàn)靈敏度下降，此時才需要進 行檢查，簡單的檢查方法是當儀器開機后，將波長調(diào)節(jié)為 580nm，將一張白紙插入到吸收池座的通光道中，如果有一 長方形的黃色光斑出現(xiàn)在白紙上，這就說明該波長準確度是 在正常的范圍，如果未出現(xiàn)，則需要進行波長矯正。如果儀 器在長途搬運后，如果更換光源的燈泡或者受到機械振動以 后，則要進行波長準確度的檢查和矯正。矯正的方法有：利 用氪燈的特征發(fā)射線矯正法，干涉濾光片法等。

5.結(jié)論

綜上，當我們使用紫外可見分光光度計的檢定過程中， 一定要遵循說明書的操作過程，以及規(guī)定的相關(guān)的工作規(guī)范， 同時注意保持相關(guān)的環(huán)境，盡量制造少塵的、甚至無塵的環(huán) 境來進行紫外可見分光光度計的校檢，同時，當我們在分光 光度計的日常使用和操作過程中，對儀器的日常維護是必不 可少的，若我們長期不使用分光光度計，需要進行除潮的操 作，定時進行開機，如:在半個月的進行通電預(yù)熱15分鐘， 讓分光光度計保持在干燥的狀態(tài)。當紫外可見分光光度計的 氪燈使用的時間接近或者超過了 500h的壽命，燈能量降低 到甚至通不過檢查，此時，我們需要換新燈進行解決。我們 在日常使用過程中，同時需要保持溫度的恒定，來營造一個 適合紫外可見分光光度計工作的環(huán)境。